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該研究針對腫瘤鐵死亡（ferroptosis）的代謝機制不明確、傳統2D培養模型難以模擬體內微環(huán)境異質(zhì)性問(wèn)題，提出結合3D腫瘤球體模型與MALDI-MSI技術(shù)，實(shí)現鐵死亡過(guò)程中脂質(zhì)代謝變化的空間可視化分析。

采用Matrix Builder基質(zhì)噴涂?jì)x，1,5-DAN基質(zhì)（3.0 mg/mL 1.5-DAN，溶劑：乙腈/異 

辛酸=80/20），布魯克的MALDI-TOF MSI儀器進(jìn)行實(shí)驗。

具體參數如下：

（1）基質(zhì)噴涂?jì)x實(shí)驗參數如下：循環(huán)次數為10次；泵速為0.1 mL/min；掃描間距為2.5 mm；噴嘴溫度為55℃；噴霧壓力為10 psi；基質(zhì)濃度為3.0 mg/mL；掃描方式為橫向掃描；噴嘴高度為4cm。

（2）MALDI-TOF質(zhì)譜分析采用Bruker Rapiflex質(zhì)譜儀。分辨率為20μm像素，激光重復頻率設為5000 Hz，單次激光脈沖頻率為200 Hz。質(zhì)荷比范圍為m/z 60-1000，數據處理使用SCiLS Lab 2018b軟件（GmbH, Bremen, Germany）和R語(yǔ)言（4.2.3版）中的“Cardinal”包（3.0.1版）進(jìn)行構建。

本研究旨在開(kāi)發(fā)一種基于MALDI-MSI的單細胞空間代謝組學(xué)方法，用于在單細胞水平上可視化腫瘤微環(huán)境（TME）中不同細胞（如癌細胞與成纖維細胞）之間的代謝相互作用。

采用Matrix Builder基質(zhì)噴涂?jì)x，1,5-DAN基質(zhì)（3.0 mg/mL 1.5-DAN，溶劑：乙腈/水=80/20），布魯克的MALDI-TOF MSI儀器進(jìn)行實(shí)驗。

具體參數如下：

（1）基質(zhì)噴涂?jì)x實(shí)驗參數如下：循環(huán)次數為14次；泵速為0.1 mL/min；掃描間距為2.5 mm；噴嘴溫度為55℃；噴霧壓力為10 psi；基質(zhì)濃度為3.0 mg/mL；掃描方式為橫向掃描；噴嘴高度為4cm。

（2）MALDI-TOF質(zhì)譜分析采用Bruker Rapiflex質(zhì)譜儀。分辨率為20μm像素，激光重復頻率設為5000 Hz，單次激光脈沖頻率為200 Hz。質(zhì)荷比范圍為m/z 60-1000，數據處理使用flexImaging（5.0, Bruker） and SCiLS Lab software（2018b, Bremen, Germany）進(jìn)行構建。